培養(yǎng)大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞的技術(shù)
2016-12-30
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很多細(xì)胞因子對于轉(zhuǎn)化的細(xì)胞及病毒感染的細(xì)胞具有溶細(xì)胞或按捺細(xì)胞成長的活性。常用的檢查細(xì)胞增殖的辦法有3H-TdR摻人法、比色法、染色法和直接計數(shù)法等。檢查細(xì)胞因子促成長活性或按捺成長活性是將不一樣稀釋度的待測樣品或細(xì)胞因子規(guī)范品與培育的細(xì)胞株一起培育必定時刻,然后檢查增殖的細(xì)胞數(shù)。此外,測定代謝產(chǎn)品熒光強度的辦法也可檢查增殖細(xì)胞數(shù),如ATP法和cAMP法。檢查細(xì)胞因子溶細(xì)胞八田胞毒活性或按捺成長活性是將不一樣稀釋度的待測樣品或細(xì)胞因子規(guī)范品與培育的細(xì)胞株一起培育必定時刻,然后檢查存活的靶細(xì)胞數(shù),并與對照對比求得溶細(xì)胞或按捺細(xì)胞成長的百分率,或以O(shè)D值對樣品稀釋度作圖,繪制規(guī)范品的劑量反響曲線,從曲線上求得相應(yīng)的待測樣品的含量。生物學(xué)活性檢查法所用的靶細(xì)胞可直接從組織中別離,如骨髓細(xì)胞的集落構(gòu)成實驗和胸腺細(xì)胞(脾細(xì)胞)的增殖實驗,或用體外培育的依靠細(xì)胞因子才干成長的細(xì)胞因子依靠株及對細(xì)胞因子殺傷靈敏的細(xì)胞作為靶細(xì)胞。細(xì)胞因子還能誘導(dǎo)靶細(xì)胞表達(dá)某些外表分子或分泌一些蛋白質(zhì),可以用熒光素標(biāo)記抗體檢查表達(dá)相應(yīng)分子的細(xì)胞數(shù),或用特定辦法測定細(xì)胞分泌的蛋白質(zhì),直接了解細(xì)胞因子的活性。
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