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實驗蛋白抗體是如何稀釋標記之謎

2016-07-11 [1580]

很多朋友在實驗過程中,常會向我們的技術提及這類問題,比如抗體中一抗,二抗應該如何稀釋,現我司技術部對此問題進行了解答:
問題:做斑點印跡,一抗為人的進口血清,二抗為羊標二抗,用的時候各自用什么稀釋 
我們所給予的解決辦法為以下三點:
一,可以用封閉液(奶粉,BSA),也可以用緩沖液如(TBST,PBST)
二,一抗(血清)用的PBS稀釋,二抗用的封閉液1%的BSA 即(PBST)可。
三,封閉液1%BSA濃度低嗎一抗、二抗都用3%或者5%BSA來稀釋比較好吧,封閉的話,用的BSA濃度一樣大就行。
研究人員對熱帶蠅類以及在其體內產卵的寄生蜂進行了仔細觀察后揭示出了一個難以置信的相互作用的復雜網絡,如果沒有先進的分子技術,其中的一些相互作用仍然不會被發現。該復雜網絡提出了有關物種是如何相互作用的問題。要揭示物種間相互作用的結果是富有挑戰性的。
在植物中,異染色質——或緊湊排列的DNA——上的一個叫作H3K27me1的特別標記在細胞分裂時必須得到保守,這樣其子細胞才能接受有著相似組織的DNA。
如今,一項由Yannick Jacob及其同事所作的新的研究顯示,在 ATXR5和ATXR6之間的特別的相互作用以及一個被稱作H3.1的組蛋白變異體在擬南芥中維持著這一關鍵性H3K27me1標志;ATXR5和ATXR6是修飾組蛋白的2個酶,而組蛋白是將 DNA裝入異染色質的蛋白。
研究人員以2.1埃的分辨率弄清楚了與H3.1肽形成復合物的ATXR5的晶體結構,而它顯示了為什么與不依賴于復制的H3.3變異體相比,ATXR5酶更傾向于依賴復制的H3.1變異體。他們的發現證明了組蛋白變異體是如何通過控制能夠重新塑造在細胞核中的異染色質的酶來指示基因表達的后生變化的。

 

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