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ELISA試劑盒研究的一般工具與方法

2014-07-25 [1018]

隨著人類基因組計劃取得巨大的成功和許多物種基因組測序的完成,僅僅靠基因組的序列來試圖闡明生命現象是遠遠不夠的,因此,ELISA試劑盒研究重心已經開始從揭示生命的所有遺傳信息轉移到在分子整體水平對功能的研究上,生命科學已實質性地跨入了后基因組時代。
盡管現在已經有多個物種的基因組被測序,但這些基因組中通常有一半以上基因的功能是未知的。
ELISA試劑盒目前功能基因組研究中所采用的策略,如微陣列法(microarray)(Wodicka et al.,1997)、基因芯片(gene chips)(Ramsay et al.,1998)、基因表達序列分析(SAGE)(Velculescu et al.,1995)等,都是從細胞中mRNA的角度來考慮的。但事實上,從DNA、mRNA到蛋白質存在三個層次的調控,mRNA自身也存在著貯存、轉運和降解等問題,從mRNA角度考慮,實際上僅包括了轉錄水平調控,并不能全面代表蛋白質表達水平。實驗也證明,組織中mRNA豐度與蛋白質豐度的相關性并不好,尤其對于低豐度蛋白質來說,相關性更差。蛋白質復雜的翻譯后修飾,蛋白質的亞細胞定位或遷移,蛋白質-蛋白質相互作用則幾乎無法從mRNA水平來判斷(曾嶸,夏其昌,2002)。新生肽鏈合成后存在多種加工、修飾過程,蛋白質間也存在類似于mRNA分子內的剪切、拼接,研究證明基本元件“intein”廣泛存在于蛋白質中(Perler et al.,1997)?;蚺c其編碼產物蛋白的線性對應關系只存在于新生肽鏈而不是zui終的功能蛋白質中。
ELISA試劑盒是生理功能的執行者和生命現象的直接體現者,對蛋白質結構和功能的研究將直接闡明生命在生理或病理條件下的變化機制;蛋白質本身的存在形式和活動規律,如翻譯后修飾、蛋白質間相互作用及蛋白質構象等問題,仍依賴于直接對蛋白質的研究來解決。因此要對生命的復雜活動有全面和深入的認識,必然要在整體、動態、網絡的水平上對蛋白質進行研究

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