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ELISA試劑盒的制備要點

2014-01-15 [930]

科研人員在具體實驗過程中更要嚴(yán)謹(jǐn)認真,ELISA試劑盒操作過程中各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,稍有不慎,出現(xiàn)顯色不全、花板等結(jié)果也是常有的事情。文章將試驗中各個操作步驟常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,希望能夠?qū)σ恍┏醪綄W(xué)習(xí)者有所幫助:這些難于采用傳統(tǒng)培養(yǎng)方法檢測的病原體感染診斷治療的要求,迫使人們必須去尋找其他的檢測途徑,直接的或是間接的。
 此外,即使是可以用傳統(tǒng)培養(yǎng)方法培養(yǎng)的病原體,僅進行形態(tài)及生物化學(xué)鑒定,有時并不足以*準(zhǔn)確地鑒定病原體,仍具有一定程度的盲目性。于是,隨著人們對病原體感染與機體免疫應(yīng)答的逐步認識,以抗原抗體特異反應(yīng)為基礎(chǔ)的,更為快速簡便的免疫檢驗方法就應(yīng)運而生了。ELISA試劑盒載體的形狀主要有三種:小試管、小珠和微量反應(yīng)板。小試管的特點是兼作反應(yīng)的容器,zui后放入分光光度計中比色。小珠一般為直徑0.6cm的圓球,表面經(jīng)磨砂處理后吸附面積大增加。
如用特殊的洗滌器,在洗滌過程中使圓珠滾動淋洗,效果更好。zui常用的載體為微量反應(yīng)板,于ELISA測定的產(chǎn)品也稱為ELISA試劑盒,通用的標(biāo)準(zhǔn)板形是8×12的96孔式。為便于作少量標(biāo)本的檢測,有制成8聯(lián)或12聯(lián)孔條的,放入座架后,大小與標(biāo)準(zhǔn)ELISA板相同。ELISA試劑盒的特點是可以同時進行大量標(biāo)本的檢測,并可在特定的比色計上迅速讀出結(jié)果。現(xiàn)在已有多種自動化儀器用于微量反應(yīng)板型的ELISA檢測,包括加樣、洗滌、保溫、比色等步驟,對操作的標(biāo)準(zhǔn)化有重要意義。

 

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